Una serina proteasa plasmática sería responsable de procesar la renina inactiva renal

pp 761-768

Resumen

Objetivos
Purificar y caracterizar una enzima plasmática (PreR-Co) que activa la renina renal.

Métodos

1. Se purificó por precipitación con (NH 4 ) 2SO4, cromatografías en DEAE celulosa, Sephacryl S- 200 HR, de inmunoafinidad e intercambio fónico en FPLC. 2. Se efectuó electroforesis en SDS- PAGE, transferencia a Immobilon-P, estudio de la secuencia N-terminal y homología en banco de datos. 3. Se estudió la actividad amidasa, esterasa y quininogenásica. 4. La renina se midió por incubación con exceso de sustrato homólogo y RIA de angiotensina I y la renina inactiva se calculó por diferencia en el contenido de renina antes del tratamiento con PreR-Co y después de él. Se estudió en extractos renales el efecto de diferentes concentraciones de enzima y la acción de inhibidores de proteasas. 5. Se investigó su acción en el plasma de rata normal y acidificado.

Resultados
1. La enzima purificada es termolábil, de PM =_ 37 kDa, es inhibida por DFP, PMSF y aprotinina. 2. La secuencia N-terminal para los 13 primeros aa fue: IIGGSMDAKGSFP Esta tiene 90% de homología con la cadena R de la haptoglobina, 69% con las serina proteasas y 65% con las calicreínas. 3. La PreR-Co incubada con quininógeno provoca liberación de quininas, hidroliza BAPNA y la unión éster del sustrato fluorogénico. 4. El extracto renal incubado con un exceso de PreR-Co aumentó 6 veces la concentración de renina activa. 5. No se observaron modificaciones de PRC cuando el plasma normal o acidificado fue tratado con PreR-Co.

Conclusiones
El 85% de la renina total del riñón es renina inactiva. La PreR-Co sería una serina proteasa probablemente de la familia de las calicreínas que es capaz de procesar la renina renal pero no la plasmática.